Fille du préfet de Padoue qui avait été converti par un missionnaire envoyé par saint Pierre, elle naquit vers l’an 45. Elle fut élevée chrétiennement par ses parents et décida d’offrir sa vie à Dieu. En l’an 54, le cruel empereur Néron monta sur le trône et ne tarda pas à amplifier les persécutions des chrétiens.
Comme Justine portait secours aux chrétiens de Padoue et les fortifiait dans leur foi, Maximien, le gouverneur nouvellement nommé pour accomplir les sombres desseins de l’empereur, donna l’ordre de l’arrêter ; elle fut conduite devant lui pour être jugée.
Le préfet commanda à Justine de sacrifier aux idoles et de l’épouser, mais elle répondit : « J’ai donné mon cœur à Jésus, Fils de Dieu. Quant aux idoles, je ne les adorerai pas. » Elle fut exécutée sur-le-champ, transpercée d’un coup d’épée, le 7 octobre 63.